蛋白質(zhì)的純化方法蛋白純化是指通過(guò)基因工程技術(shù)將編碼蛋白的核酸序列導(dǎo)入到宿主細(xì)胞，使其大量表達(dá)，再使用適當(dāng)?shù)募兓椒▽⑵湓隗w外純化出來(lái)，從而獲得高純度、活性和產(chǎn)量的蛋白質(zhì)。那么蛋白質(zhì)的純化方法都有什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、凝膠層析：根據(jù)分子大小從混合物中分離蛋白質(zhì)，不同蛋白的形態(tài)和分子大小存在差異，在混合物通過(guò)含有填充顆粒的凝膠層析柱時(shí)，由于各種蛋白的分子大小不同，擴(kuò)散進(jìn)入特定大小孔徑顆粒內(nèi)的能力也不同，大的蛋白分子會(huì)被先洗脫出來(lái)，分子越小越晚洗脫。二、離子交換層析：基于蛋白表面所帶電荷量不同進(jìn)行蛋白分離純化，蛋白表面通常會(huì)均勻帶有一定的電荷，在一定條件下可以與正/負(fù)離子交換柱結(jié)合。在改變pH或者用逐漸增加離子強(qiáng)度的緩沖液洗脫時(shí)，結(jié)合的物質(zhì)可與洗脫液中的離子發(fā)生交換而被洗脫到溶液中。由于不同物質(zhì)的電荷不同，與離子交換柱的結(jié)合能力也不同，因此被洗脫到溶液中的順序也不同。三、疏水相互作用層析：利用蛋白質(zhì)的疏水性，蛋白經(jīng)變性處理或處于高鹽環(huán)境下疏水殘基會(huì)暴露于蛋白表面，不同蛋白疏水殘基與固定相的疏水性配體之間的相互作用強(qiáng)弱不同，依次用從高至低離子強(qiáng)度洗脫液可將疏水性由弱至強(qiáng)的成分分離。四、親和層析：將待純化的某一蛋白質(zhì)(或在蛋白質(zhì)上加上標(biāo)簽)的特異配體通過(guò)適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)方法共價(jià)連接到載體分子上，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)混合物加到填有親和介質(zhì)的層析柱時(shí)，待純化的蛋白質(zhì)與配體特異性結(jié)合，而其他蛋白質(zhì)則不被結(jié)合，通過(guò)洗滌除去，被特異結(jié)合的蛋白質(zhì)可以用含游離的相應(yīng)配體溶液洗脫下來(lái)。更多有關(guān)蛋白質(zhì)的純化方法，請(qǐng)聯(lián)系天津益元利康生物科技有限公司！